PD-L1

[Franta]

Na rozdíl od předešlých studií, kde se myším podávala subkutální injekce v několika bodech na zádech, tak tato studie používá zcela novou metodu k imunizaci (=vpravení choroby podobné eresky) myši - jednu subkutální injekci do myšího podpaždí. Injekce do této oblasti umožňuje jednoduchý transport antigenů a je to tak uděláno proto, aby se osvětlili imunologické reakce. Navíc, injekce do jednoho bodu může předejít toleranci zvířat s vyšší citlivostí na antigeny a tak zredukování nemocnosti.
Tato studie je charakterizována faktem, že používané modely EAE jsou podobné roztroušené skleróze u lidí, tak jak bylo detekováno kontrastním barvením ematoxylin-eosin staining a Luxol fast-blue staining.
Výsledky imunohistochemické detekce ukázaly, že exprese molekuly PD-L1 byla zvýšena v míše, přičemž průtoková cytometrie a western blot analýzy odhalily exprese molekuly PD-L1 byla také zvýšená také v splenocytech.
Tento důkaz poskytuje základ pro prozkoumávání role PD-L1 u roztroušené sklerózy.

EAE je myší model lidské roztroušené sklerózy s podobnou patologií a patogenesí. Buňky Th1 hrají důležitou roli v patogenesi EAE. Tato studie určila možný účinek PD-L1 v patogenesi EAE navozené injekcí myelinového oligodendrocytového glykoproteinu, kompletovaného Freunds látkou zvyšující účinek a toxínu Bordetella pertusis do myši C57BL/6J,
U myši s EAE se rozvinula choroba a ukázaly se zánětlivé změny v CNS na kontrastním zbarvení hematoxylin-eosinu patologických sekcí míchy a demyelinace na kontrastním zbarvení Luxol fast-blue a klinické příznaky.
Exprese PD-L1 u myši byla detekována imunohistochemicky, průtokovou cytometrií a analýzami western blot. Byla u myší významně zvýšená exprese PD-L1 v míše a splenocytech v porovnání s normálními myšmi. Naše objevy naznačují zapojení PD-L1 v patogenesi EAE a naznačují že by měly zkoumány u roztroušené sklerózy.

Celý článek pro vědce:
http://www.nrronline.org/article.asp?is ... ;aulast=Li


Pojmy:
PD-L1 - ligand 1 naprogramované buněčné smrti - je to bílkovina, která se váže na svůj receptor PD-1 na T-buňkách (i na B buňkách a myeloidech) a moduluje tak jejich aktivaci a nebo jejich potlačení. Konkrétně na T-buňky doručuje signál který potlačuje TCR řízenou aktivaci produkce IL-2 a proliferaci T-buněk.

Western Blot (v české literatuře též označovaný jako imunoblot) je analytická technika používaná k detekci specifického proteinu ve směsi s dalšími proteiny, např. ve vzorku homogenátu tkáně či jiného biologického vzorku. Využívá gelovou elektroforézu k separaci proteinů podle jejich velikosti (denaturující SDS-PAGE), popř. podle jejich celkové trojrozměrné struktury (nativní elektroforéza). Následně jsou proteiny přeneseny ("přeblotovány") z gelu na povrch membrány (nejčastěji nitrocelulosové či PVDF), na jejímž povrchu jsou detekovány specifickými protilátkami. Touto metodou se v praxi diagnostikuje řada infekčních onemocnění člověka a zvířat. Oproti běžným sérologickým metodám jako je ELISA, je Western Blot sice časově náročnější a dražší, ale za to přesnější (větší specifičnost). (wikipedie)